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acridine是什么意思(aciel是什么意思)
大家好!今天讓創(chuàng)意嶺的小編來大家介紹下關(guān)于acridine是什么意思的問題,以下是小編對(duì)此問題的歸納整理,讓我們一起來看看吧。
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本文目錄:
一、食道和胃連接地方叫什么,那個(gè)字怎么念
食道和胃連接地方叫:賁門(bēn mén)。
賁門位于管狀
擴(kuò)展資料:
賁門組織學(xué)特點(diǎn):
賁門黏膜是由單層柱狀上皮和僅由黏液細(xì)胞組成的黏液腺體構(gòu)成。過去大多數(shù)人認(rèn)為賁門黏膜是從出生就存在的正常組織,但近年來越來越多的學(xué)者提出CM不是一個(gè)自然的結(jié)構(gòu),而是由食管末端化生形成的,并且可能是食管胃交界部反流性疾病的早期組織學(xué)表現(xiàn)。
食管胃交界部主要有3種細(xì)胞:黏液細(xì)胞、壁細(xì)胞和主細(xì)胞。賁門腺的黏液細(xì)胞所分泌的黏液為中性黏液,用黏液組化染色呈PAS陽性反應(yīng),阿爾新藍(lán)(AB,Alciablue)(pH2.5)反應(yīng)陰性。
鑒定壁細(xì)胞的主要方法是熒光探針吖啶橙(AO,Acridineorange):壁細(xì)胞細(xì)胞核發(fā)黃綠熒光,胞質(zhì)發(fā)紅光,而其它細(xì)胞的胞質(zhì)不著色。主細(xì)胞以胃蛋白酶原為其標(biāo)志物采用胃蛋白酶原的抗體和PA-SP雙重免疫組化染色。
區(qū)別主細(xì)胞和壁細(xì)胞可以加入甲苯胺藍(lán)和一品紅染色劑后在光鏡下根據(jù)細(xì)胞大小、結(jié)構(gòu)、顏色區(qū)別:主細(xì)胞核經(jīng)Hem染色后顯深藍(lán)色,壁細(xì)胞直徑較主細(xì)胞長,染色后顯紅色。黏液細(xì)胞和主細(xì)胞在HE染色和Malory氏染色中都不易區(qū)別,可用黏液胭脂紅染色或PAS反應(yīng)染色進(jìn)行區(qū)別。
參考資料:百度百科---賁門
二、電泳指示劑和染色劑有何區(qū)別,各自的作用是什么
電泳后,核酸需經(jīng)染色才能顯色出帶型,常用以下核酸染色劑: 1、溴化乙錠(ethidium bromide,EB)最常用的核酸熒光染料,可嵌入核酸雙鏈的配對(duì)堿基之間,在紫外線激發(fā)下,發(fā)出桔紅色熒光.EB-DNA復(fù)合物中的EB發(fā)出的熒光,比游離的凝膠中的EB發(fā)出的熒光強(qiáng)度大10倍,因此無需洗凈背景即可清楚觀察核酸帶型.若EB背景太深,可將凝膠 浸泡于1mmol/LMgSO4中1h或10mmol/L MgCl2中5min,使非結(jié)合的EB褪色,這 樣可檢查到10ng的DNA樣品,EB也可用于檢測單鏈DNA或RNA,但其對(duì)單鏈核酸的親和力相對(duì)較小,熒光產(chǎn)率也相對(duì)較低. 在凝膠或電泳緩沖液中加入終濃度為0.5μg/ml的EB,染色可在電泳過程中進(jìn)行,能隨時(shí)觀察核酸的遷移情況.但EB帶正電荷,嵌入堿基后增加了 核酸分子的剛性,使遷移率減慢,故不宜用于測定核酸分子量的大小,這時(shí)應(yīng)在電泳后將凝膠浸入0.5μg/ml的EB水溶液中10min進(jìn)行染色.EB見光 易分解,應(yīng)于4℃避光保存, 2、吖啶橙(acridine orange,AO):吖啶橙可嵌入雙鏈核酸堿基對(duì)之間,在254nm紫外線激發(fā)下發(fā)出530nm的綠色熒光;還通過靜電與單鏈核酸的磷酸基結(jié)合,在254nm紫外線激發(fā) 下產(chǎn)生640nm的紅色熒光.因此可區(qū)分單鏈和雙鏈核酸,靈敏度分別為0.1μg和0.05μg.但吖啶橙的染色操作要求嚴(yán)格,應(yīng)在 22℃,0.01mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.0)中避光浸泡30min,然后在搪瓷盤中用該緩沖劑4℃脫色過夜或22℃脫色1~2小時(shí). 3、銀(Ag+)試劑: Ag+與核酸形成穩(wěn)定復(fù)合物,然后用甲醛使Ag+還原成銀顆粒.AgNO3等試劑可使聚丙烯酰胺凝膠上的單鏈,雙鏈DNA及 RNA都染成黑褐色.銀染法的靈敏度比EB染色高200倍左右,比亞甲藍(lán)染色高100~1000倍,在小于0.5mm厚的凝膠中,能檢測出0.5ng的 RNA,其缺點(diǎn)是專一性不強(qiáng),能與蛋白質(zhì),去污劑反應(yīng)也產(chǎn)生褐色,而且對(duì)DNA的染色定量不準(zhǔn)確.銀與DNA穩(wěn)定結(jié)合,對(duì)DNA有破壞作用,不適于DNA 片段回收的制備. 4、亞甲藍(lán)(methylene blue)可將RNA染成藍(lán)色,但靈敏度不高,而且操作時(shí)間長.膠浸泡于0.02%的亞甲藍(lán),10mmol/L Tris-Ac(pH8.3),4℃放置1~2h,用凈水洗5~8h(反復(fù)換水),帶型肉眼可見,最低檢測量為 250ng.
三、常用防腐劑二十種是什么?
常用防腐劑有:
苯甲酸鈉、
辨析分類:
習(xí)慣上,二者常以用途而不是以化學(xué)結(jié)構(gòu)相區(qū)分,因?yàn)橥晃镔|(zhì)如苯酚(phenol)低濃度時(shí)用作防腐劑,較高濃度時(shí)用作消毒劑。多數(shù)認(rèn)為,防腐劑一詞不適用于全身應(yīng)用的藥物。
常用作防腐劑和消毒劑的藥物有苯酚的各種取代物如聯(lián)苯酚(biphenols)、甲酚(cresols)、二甲苯酚(xylenols),陽離子表面活性物質(zhì),鹵素(halogens),氧化劑如過氧化氫(hydrogen per-oxide)和高錳酸鹽(perman-ganates),苯胺染料(aniline dyes)和吖啶染料(acridine dyes),重金屬鹽,醇類(alcohols)和醛類(aldehy-des)等。
防腐劑也應(yīng)用以保持食品原有品質(zhì)和營養(yǎng)價(jià)值為目的的食品添加劑。規(guī)定使用的防腐劑有苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸、山梨酸鉀、丙酸鈣等25種。
四、什么是“組織化學(xué)”
組織化學(xué)是指以常用的組織化學(xué)技術(shù),對(duì)細(xì)胞內(nèi)主要化學(xué)成分和活性的粗略(一般性)的研究.
概要介紹如下:
一,______ 核酸(DNA和RNA)
(一)__ 化學(xué)特性
1.分布: DNA (細(xì)胞核內(nèi))
RNA(核仁10% ;細(xì)胞質(zhì)-核糖體90%)
2. 分子結(jié)構(gòu):戊糖 + 磷酸 + 堿基
特點(diǎn):① 大量的磷酸基團(tuán)→酸性
(嗜堿性的基礎(chǔ))
② 戊糖—被鹽酸水解→醛基
(成為Feulgen法顯示核酸的基礎(chǔ))
② 戊糖—被鹽酸水解→醛基 (成為Feulgen法顯示核酸的基礎(chǔ))
③ 可以完全水解或部分水解
④ 可以用RNAase或DNAase消化
[ 對(duì)照實(shí)驗(yàn)(—)]
_
(一)__ 顯示方法
1. 福爾根(Feulgen)反應(yīng)顯示DNA
[ 原理 ] 在60℃溫度下,將DNA用1N鹽酸水解,DNA雙鏈打開成單鏈,先釋出堿基,然后脫氧核糖釋出醛基,該醛基與Schiff氏液形成紫紅色沉淀.
[ Schiff試劑顯色原理 ]
堿性品紅 亞硫酸 → 白亞黃酸
(無色試劑,稱為Schiff試劑)
[方法]
固定劑的選擇可用一般的組織學(xué)固定液,常
用Carnoy固定液.
Carnoy固定液:
純酒: 氯仿: 冰醋酸 = 6:3:1
(60ml) (30ml) (10ml)
恒冷箱切片機(jī)的具體染色步驟如下:
⑴ 切片固定在冰醋酸與純乙醇(1:3 V/V)
中10分鐘.
⑵ 由乙醇降至蒸餾水中.
⑶ 用1N鹽酸浸泡.
⑷ 放入預(yù)熱到60℃的1N鹽酸中,留6分鐘.
⑸ 放入室溫的1N鹽酸中.
⑹ 放入Schiff液試劑,保持在暗處,60分鐘
⑺ 用新配制的SO2水浸洗3次(脫掉未反應(yīng)
的Schiff液).
⑻ 蒸餾水浸洗凈(必須用蒸餾水→洗凈無色品紅,
否則,殘留試劑→有色品紅).
⑼ 脫水透明,封固.
結(jié)果:核內(nèi)DNA染為紅紫色.
對(duì)照:僅改變第4步為1N鹽酸,室溫15分鐘→(-).
[ 注意事項(xiàng) ]
⑴ 不用醛類固定劑如Bouin,戊二醛,丙烯醛等.
常用Carnoy液,甲醇等.
⑵ 控制水解時(shí)間,不同的固定劑用不同的時(shí)間,
如:Carnoy 8分鐘;Genker 5分鐘;
Susa 18分鐘 ★ 最適條件應(yīng)自行試驗(yàn).
⑶ 控制溫度,一般1N鹽酸60℃;
如果5N鹽酸18~25度.
⑷ 保證Schiff試劑的純凈度.
⑸ SO2要新配制,除去多余的 Schiff液宜用之.
⑹ 必須對(duì)照.
2._ 顯示核酸的其它方法
⑴ Kurnick甲綠Methylgreen顯示DNA法
⑵ 甲綠派若寧Methy green-Pyronin顯示DNA和
RNA法
⑶ 菊花青鉻明礬(GC)顯示核酸法
⑷ 丫啶橙Acridine Orange顯示DNA和RNA法
⑸ 核酸提取法
_一,______ 蛋白質(zhì)(Protein)
_
(一)蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)
蛋白質(zhì)的基本單位是氨基酸,肽鍵將不同的氨基酸結(jié)合在一起,除氨基和羧基之外,還含有其它基團(tuán),如:—羥基,硫氫基,二硫基等.依其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)可分為:酸性氨基酸 和堿性氨基酸 ;芳香族氨基酸:苯丙氨基酸,酪氨基酸;雜環(huán)類氨基酸:組氨基酸,色氨基酸,亞氨基酸,脯氨基酸,羥脯氨基酸.
_
(二)目前應(yīng)用
1._ 用于蛋白質(zhì)的一般定性
① 確定是否為蛋白質(zhì)
② 確定蛋白質(zhì)的酸堿性
③ 顯示蛋白質(zhì)的特殊基團(tuán)
2._ 用于蛋白質(zhì)功能定性和定位
_(三)染色方法
目前,研究蛋白質(zhì)功能定性和定位時(shí)多用酶
組織化學(xué)法,配體—受體結(jié)合法,免疫組化法以
顯示特殊的蛋白質(zhì).這里僅介紹一般的染色方法.
1.四氮化聯(lián)鄰茴香胺法
(Tetra-azotized-o-anisidine)
[ 應(yīng)用 ] 廣泛應(yīng)用于顯示酶的活性
[ 原理 ] 芳香伯胺與亞硝酸作用,在低溫下(<
5℃)可生成重氮鹽,此即重氮反應(yīng).重氮鹽可
與酚類作用生成有色化合物——偶氮化合物.上
述反應(yīng)必須在酸性條件下進(jìn)行.
本實(shí)驗(yàn),聯(lián)鄰茴香胺在酸性,低溫條件
下與亞硝酸作用生成四氮鹽.四氮鹽有兩個(gè)
重氮鹽,其中一個(gè)重氮基在堿性條件下與所
要顯示的組氨酸,色氨酸及酪氨酸的苯環(huán)結(jié)
合產(chǎn)生偶聯(lián)反應(yīng),另一個(gè)重氮基與酚類或奈
類發(fā)生偶聯(lián)反應(yīng)以增色.因此,可以用生成
的偶氮染料來代表組織細(xì)胞的蛋白質(zhì)含量.
[ 方法 ]
1._ 四氮鹽配制
⑴ 天平稱取聯(lián)鄰茴香胺0.25g(有毒,通
風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行).
⑵ 在冰浴下,加入已預(yù)冷8%鹽酸10ml,
玻璃攪拌,促其溶解,混合后為懸濁液.
⑶ 稱NaNO2 0.15g溶于1ml蒸餾水中(冰浴
下).
⑷在冰浴下,將配好的NaNO2溶液分三次倒入鄰聯(lián)茴香胺懸濁液內(nèi),每次倒入都須玻棒攪動(dòng),因產(chǎn)生NO2可有黃煙冒出,至黃煙停止再倒下一次液體.放入冰箱(4℃)內(nèi),約20分鐘,待溶液變?yōu)辄S色.
⑸傾出上清液,勿將沉渣泛起,棄去沉渣.
⑹用NaHCO3細(xì)粉(約0.5~0.6g)逐漸加
入上清液內(nèi),邊加邊攪拌(冰浴下).
⑺以剛果紅試紙測中和點(diǎn),待試紙不變藍(lán)即達(dá)到中和.收集于標(biāo)本瓶(或廣口瓶)內(nèi),置冰箱備用.此液不穩(wěn)定,置冰箱內(nèi)可保存兩周,若變?yōu)殚偌t色則失效.
_
2._ 偶氮反應(yīng)
—Carnoy固定的大鼠肝,腸等石蠟切片.
⑴ 切片脫蠟至水.
⑵ 將切片放入下列溶液中(在冰浴中至2~3℃),
浸染10分鐘.
用前配制:
四氮化聯(lián)鄰茴香胺溶液 4ml
0.1巴比妥緩沖液 (pH9.2) 20ml
24ml
⑶ 入1N鹽酸(冰浴中2~3℃)浸洗10秒,多余鹽
酸以濾紙吸干.
⑷ 入H酸飽和液,浸染30分鐘(冰浴或冰
箱內(nèi)).
H酸飽和液配制:H酸 0.4g
0.1M巴比妥緩沖液 20ml
(pH9.2) 過濾后使用!
⑸ 蒸餾水沖洗,脫水,透明,封固(樹膠)
[ 結(jié)果 ]
酪氨酸,組氨酸,色氨酸染成紅棕色(+)
※ 0.1M巴比妥鈉50ml配制
① 分析天平稱巴比妥鈉(MW=206.18)
1.0309g
② 于量瓶內(nèi)+蒸餾水50ml至刻度即可.
0.1M巴比妥緩沖液,pH9.2(20ml)配
制: 0.1M巴比妥鈉 19.1ml
0.1N鹽酸 0.9 ml
20 ml
2.其它的顯示蛋白質(zhì)的方法
⑴ 米朗反應(yīng)(Millon Reastion)→顯示酪氨
酸的方法
酪氨酸→羥苯基 亞硝酸 →亞硝基苯+Hg→有色物
注:膠原蛋白不顯色,其它蛋白質(zhì)都顯色(+)
⑵二硝基氟苯Dinitro—fluoro—benzene (DNFB)法
DNFB與—NH2,SH和酪氨酸產(chǎn)生弱有色反應(yīng),
可被偶氮染料加強(qiáng).
⑶ 酪氨酸重氮化偶聯(lián)反應(yīng)
⑷ 蛋白質(zhì)硫氫基DDD法(固定時(shí)避免
氧化劑)
⑸ 鐵—鐵氰化鉀反應(yīng)顯示SH基
⑹ 高甲酸阿爾辛藍(lán)顯示SS基法
⑺ 免疫熒光法顯示蛋白質(zhì)
三,碳水化合物
中性多糖——糖原
碳水化合物 酸性多糖——硫酸軟骨素 A,B,
C,肝素,硫酸角
(組織中—多糖類) 質(zhì)素,透明質(zhì)酸等
蛋白多糖——粘蛋白,唾酸粘蛋白
糖 脂——腦苷脂類
※ 組織中糖的種類較多,因此,要特異性地顯示各種
糖類必須用抑制和酶水解來對(duì)照實(shí)驗(yàn).
本章僅以高碘酸雪夫法(PAS法)說明之,其它的
方法還有Alcian blue法,甲苯胺藍(lán)異染性染色法等.
高碘酸雪夫法 Periodic—Schiff(PAS)method
[ 原理 ] 高碘酸為強(qiáng)氧化劑,它可以氧化多糖
分子內(nèi)1,2—乙二醇(順式和反式)而
產(chǎn)生醛基,此醛基再與Schiff試劑結(jié)合即
產(chǎn)生紅 紫色.
[ 方法 ] 改良的McManus(1946),高碘酸雪夫法
標(biāo)本:
① Carnoy固定的大白鼠肝,腎,腸石蠟切片
② 大白鼠肝橫冷箱切片(未固定)
[ 步驟 ]
(1) 切片脫蠟入水(橫冷箱切片免)
(2) 入0.5%高碘酸水溶液,室溫,2~5分鐘
(3) 蒸餾水涮洗
(4) 入Schiff試劑,洗3次,每次2分鐘
(5) 入SO2水中,洗3次,每次2分鐘
(6) 自來水洗5~10分鐘
(7) 蒸餾水稍洗
(8)入Mayer氏蘇木精副復(fù)染核1分鐘
(9) 自來水5分鐘,換蒸餾水
(10)脫水,透明,封固
[ 結(jié)果 ]
PAS(+)→紅紫色或紅色;核→藍(lán)色
Carnoy固定,糖原原位定位不佳,有
移位現(xiàn)象.
[ 對(duì)照 ]
① 用唾液酸淀粉于37℃消化20~30分鐘.
② 苯甲?;蛞阴;ㄗ鲗?duì)照(抑制法)
[ 注意事項(xiàng) ]
①必須按照規(guī)定配方配制試劑,按規(guī)定的時(shí)間 反應(yīng).以避免非特異反應(yīng).例如:入高碘酸水溶液時(shí)間不宜過長,否則非特異著色.
②多糖大多都易溶于水,固定時(shí)應(yīng)避免擴(kuò)散或移位.
冰凍切片+苦味酸福爾馬林→固定→避免擴(kuò)散或移位.
③注意溶液的pH值:高碘酸液的pH不應(yīng)超過5.
④注意溫度.反應(yīng)宜在<25℃的室溫下進(jìn)行,否則可氧化醛基為羧酸.
⑤高碘酸溶液的濃度宜控制在0.5%~1%(0.02—0.1M)濃度過高則會(huì)發(fā)生非特
異反應(yīng).
⑥為充分顯示多糖中的糖原,可在過碘酸
中加入5%醋酸或純乙醇固定,但往往有
溶解和擴(kuò)散.
⑦為阻止膠原纖維和網(wǎng)狀纖維陽性反應(yīng),
可使用還原液,于使用Schiff液之前.
[ 分析結(jié)果 ] PAS反應(yīng)陽性物質(zhì):糖原,中
性粘蛋白,中性唾液性粘蛋白.
四,脂類
[ 組織中的脂類 ]
單純脂類 脂肪酸
醇的化合物(如:甘油三脂等)
復(fù)合脂類 磷脂(卵磷脂,腦磷脂)
脂類 鞘磷脂
糖脂(腦苷脂,神經(jīng)苷脂)
衍生脂類 膽固醇
腎上腺素
性激素
[ 顯示脂類的基本原理 ]
用易溶于脂類的染料,使之溶于所檢
的脂質(zhì)(如脂滴)中,使組織內(nèi)的脂類著色.
[ 常用方法 ]
蘇丹黑B法,油紅O法,硫酸尼羅藍(lán)法
[ 基本要求 ]
⑴ 不用石蠟切片.
⑵ 固定劑一般用Formalin保存磷脂較好.
⑶ 方法:
① 物理法:脂溶性染料,不溶于水,屬偶
氮染料.常用蘇丹Ⅲ,Ⅳ,蘇
丹黑 ,油紅O等.
② 化學(xué)方法:硫酸尼羅藍(lán)顯示脂肪酸.
③ 選擇性提取法(對(duì)照)
實(shí)驗(yàn)舉例:蘇丹黑B法
[ 原理 ]
蘇丹黑為偶氮染料,具有脂溶性,可
溶于無水酒精,但不溶于水(常用70%酒
精飽和液).當(dāng)組織切片入染液時(shí),蘇丹
黑B便離開染液而溶于組織內(nèi)的脂質(zhì)(如脂
滴中)使組織內(nèi)脂類著色.
標(biāo)本:
兔腎上腺和睪丸橫冷箱切片,10μm厚,不
固定(或用10%Formalin固定10分鐘后水洗).
[ 方法 ]
① 入蒸餾水洗
② 于70%乙醇內(nèi)涮洗
③ 入蘇丹黑B 70%B飽和液,染5~10分鐘
④ 于50%酒精內(nèi)浸洗
⑤ 蒸餾水中洗
⑥ 入Mayer蘇木精(復(fù)染細(xì)胞核)1分鐘
⑦ 自來水沖洗5~10分鐘
⑧ 入蒸餾水
⑨ 甘油明膠(或Apathy糖膠)封固
[ 結(jié)果 ] 細(xì)胞內(nèi)脂滴均呈黑色
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