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gfaas是什么光譜分析法（光譜fsr是什么意思）

發(fā)布時(shí)間：2023-04-14 02:54:40 稿源：創(chuàng)意嶺閱讀： 65

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本文目錄:

1、地質(zhì)樣品中鎘的物相分析
2、金屬硫蛋白的檢測(cè)方法
3、土壤檢測(cè)方法
4、怎樣知道自己是否有血鉛

gfaas是什么光譜分析法（光譜fsr是什么意思）

一、地質(zhì)樣品中鎘的物相分析

下面介紹的鎘的物相分析方法可測(cè)定地質(zhì)樣品中的氧化作用、硫化物相和鐵氧化物結(jié)合相。

方法提要

本分析系統(tǒng)可測(cè)定氧化物相（主要為碳酸鹽）、硫化物相和結(jié)合相（鐵錳氧化物和硅酸鹽）中Cd。方法采用乙酸（1+9）在沸水浴上浸取鎘的氧化物。用飽和溴水室溫振蕩浸取鎘的硫化物。殘?jiān)盀V紙經(jīng)灰化，灼燒后，用HF和HCl處理，測(cè)定結(jié)合相中鎘。采用GFAAS法測(cè)定鎘，檢出限為w（Cd）=0.01×10^-6，適用于礦石和土壤中痕量隔的物相分析，對(duì)含量較高的鎘可用FAAS法測(cè)定。分析流程見圖1.15。

圖1.15 地質(zhì)樣品中鎘的物相分析流程

設(shè)備和試劑配制

無火焰原子吸收光譜儀。

混合溶液氨水和250g/L（NH₄）₂CO₃溶液按2：1混合。

鎘標(biāo)準(zhǔn)溶液稱取200mg 金屬鎘，加少量HNO₃溶解，蒸干，再加少量HCl 溶解，用水洗入200mL容量瓶中定容。此溶液含1.00mg/mL Cd，作為儲(chǔ)備溶液。將此溶液用HCl（1+99）稀釋成0.50μg/mL的工作溶液。

分析步驟

（1）氧化物中鎘的測(cè)定。稱取0.1～0.5g試樣于200mL錐形瓶中，加入50mL乙酸（1+9），置于沸水浴上浸取30min，取下稍冷后，用慢速濾紙加紙漿過濾，濾液接入150mL燒杯中，用乙酸（2+98）洗錐形瓶1～2次，洗殘?jiān)?～4次，濾紙連同殘?jiān)D(zhuǎn)入原錐形瓶中，保留用于測(cè)定下一相。濾液經(jīng)適當(dāng)處理后，用GFAAS法測(cè)定Cd。

（2）硫化物相中鎘的測(cè)定。向原錐形瓶中的不溶殘?jiān)尤?0mL飽和溴水，加塞后置于振蕩器上振蕩30min，取下用中速濾紙過濾，用水洗錐形瓶2～3次，洗殘?jiān)盀V紙至無黃色為止（上述操作在通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行）。殘?jiān)Ａ簦糜跍y(cè)定下一相。濾液經(jīng)適當(dāng)處理后，同氧化物相測(cè)定Cd。

（3）鐵硅結(jié)合相中鎘的測(cè)定。浸取硫化物后的殘?jiān)B同濾紙轉(zhuǎn)入瓷坩堝中，在電熱板上炭化后，置于馬弗爐中于400～500℃灼燒30min。將殘?jiān)D(zhuǎn)入聚四氟乙烯燒杯中，加20mL HCl，在電熱板上溶解片刻后，加5mL HNO₃、2～3mL HF，待試樣溶好后，蒸發(fā)至干。用水洗杯壁，加5mL HCl重復(fù)蒸干一次。加3mL王水（1+1），加熱使鹽類溶解。以下同前述測(cè)定Cd。

（4）分相后鎘的測(cè)定。向分相后的濾液加入5mL HNO₃，蒸發(fā)至干，取下，加3mL HCl，蒸至近干，加3mL王水（1+1），加熱至鹽類溶解，取下，稍冷，滴加10mL混合溶液，加入1mL H₂O₂，轉(zhuǎn)入25mL比色管中，加入1g硫脲，用水定容。放置至溶液澄清，用GFAAS法測(cè)定Cd。

注意事項(xiàng)

（1）測(cè)定Cd時(shí)，溶液中以含有30～50mg Fe為宜，如含F(xiàn)e少時(shí)，應(yīng)在用氨水沉淀前補(bǔ)加Fe。

（2）含Mn高于5 mg時(shí)，加混合溶液沉淀后加熱煮沸3min。

二、金屬硫蛋白的檢測(cè)方法

隨著對(duì)MT研究的進(jìn)一步深入，建立的MT檢測(cè)方法較多，但所有這些方法都是建立在MT的理化特性和生物特性以及免疫學(xué)特性基礎(chǔ)上，主要分以下幾大類。此方法主要是利用巰基（-SH）在汞滴表面產(chǎn)生氧化還原出現(xiàn)的電位變化建立的，以測(cè)定巰基來計(jì)算MT的含量，是一種可以直接用于測(cè)定MT總量的方法，具有一定的特異性。其檢測(cè)限可達(dá)ng/ml水平。

運(yùn)用檢測(cè)MT的電化學(xué)方法有：示差脈沖極譜法（DPP）、微分脈沖極譜法、示差脈沖陽極溶出伏安法（DPASV）和循環(huán)伏安法（CV）等。Bordin等通過改變檢測(cè)體系的pH值，利用DPP可以很方便地檢測(cè)出樣品中多種形式的MT，同時(shí)能快捷地分析出還原型的MT。此類方法主要是通過蛋白質(zhì)含量測(cè)定來計(jì)算MT濃度，免疫法是最主要的方法。它尤其適合于微量檢測(cè)，具有靈敏、特異的特點(diǎn)，靈敏度在pg/ml級(jí)，對(duì)存在體液中含量甚微的MT具有較好的檢測(cè)效果。在近些年，先后建立了Western Blotting法、放射性免疫檢測(cè)法（RIA）和酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）。

RIA法首先由Mallie等在1979年檢測(cè)大鼠血清中MT的含量時(shí)建立的，隨后Mulder等建立了測(cè)定人體液中MT含量的RIA，Zahir Shaidh A等報(bào)道了用RIA檢測(cè)鎘污染地區(qū)人群的尿液MT含量。此方法的檢測(cè)范圍在0.1～100ng/ml之間，但是此方法要用放射性同位素，需要3天左右的時(shí)間，給檢測(cè)帶來不便。

1986年Thomas等建立了ELISA法，與RIA法無顯著差異，靈敏度可達(dá)100pg/ml，與RIA相比具有測(cè)定相對(duì)迅速，且不需昂貴的儀器設(shè)備和接觸放射性同位素。Akintola等在1995年利用MT-1制備抗體建立了ELISA測(cè)定人血漿和尿液中的MT含量，檢測(cè)限可達(dá)5ng/ml。鄭軍恒等在檢測(cè)人血液中的MT過程中建立了2種ELISA方法，直接型ELISA的檢測(cè)范圍為1～10ng，可用于檢測(cè)較純樣品，競(jìng)爭(zhēng)性ELISA較好的檢測(cè)范圍是50～500ng，用于檢測(cè)較粗的樣品中MT的含量。采用液相色譜（LC）和紫外（UV）相結(jié)合檢測(cè)確定家兔肝臟中分離脫金屬硫蛋白的最佳條件，同時(shí)，利用LC-ES-MS可以確定家兔肝臟中不同結(jié)構(gòu)的脫金屬硫蛋白，主要對(duì)MT-Ⅰ和MT-Ⅱ的結(jié)構(gòu)及其同分異構(gòu)體進(jìn)行了研究。

由于目前金屬硫蛋白的測(cè)定主要采用紫外-可見分光光度法以及原子吸收光譜法測(cè)定其中的金屬離子。前一種方法靈敏度較低，由于檢測(cè)取樣少，檢測(cè)過程中造成的誤差較大，后一種方法卻因?yàn)榉蛛x純化過程中可能有部分金屬脫離蛋白造成損失引起誤差，且測(cè)定費(fèi)用昂貴。針對(duì)這種情況，建立了鎘金屬硫蛋白的非原子化測(cè)定方法，檢出限與石墨爐法（GFAAS）相近。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展，使MT克隆技術(shù)、RNA印跡技術(shù)和PCR技術(shù)應(yīng)用于MT的定量檢測(cè)成為現(xiàn)實(shí)。MT克隆檢測(cè)是通過MT多克隆和單克隆抗體，運(yùn)用免疫擴(kuò)散、免疫電泳等方法來檢測(cè)組織中的MT-mRNA含量進(jìn)行定量分析，這在MT分子的生物學(xué)研究中有很重要的意義。

MT多采用聯(lián)機(jī)檢測(cè)，雖然以免疫法最為可靠，但是檢測(cè)過程復(fù)雜，時(shí)間消耗大，聯(lián)機(jī)檢測(cè)大大節(jié)省了時(shí)間，同時(shí)可以減少檢測(cè)過程中產(chǎn)生的誤差。MT在逐步產(chǎn)業(yè)化，然而目前還缺乏一種簡(jiǎn)便、靈敏、快捷適宜產(chǎn)業(yè)化的分離純化和檢測(cè)技術(shù)，這也成為MT研究的熱點(diǎn)。

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三、土壤檢測(cè)方法

一、看土壤的顏色

土壤的顏色是反映土壤在肥力上的一個(gè)明顯指標(biāo)，也是一個(gè)最容易掌握的方法。一般土壤顏色比較深的都是肥土，顏色較淺的則為瘦土。

二、看土層深淺（耕作層）

土壤肥沃的田塊土層都比較深，深度通常都大于60公分（水田除外），而貧瘠瘦土則非常淺，嚴(yán)重地區(qū)甚至低于20公分，只是表層有一層土而已。

三、看土壤適耕性

一般土壤肥沃的田塊，土層疏松，易于耕作，“干耕像香灰，濕耕如糖化”；而土壤貧瘠的田塊，土層黏犁，耕作費(fèi)力，“敲敲一個(gè)洞，鋤鋤一條縫”。

四、看淀漿及裂紋

肥土不易淀漿，土壤裂紋多而?。皇萃翗O易淀漿，易板結(jié)，土壤裂紋少而大。

五、看水質(zhì)

水滑膩、黏腳，日照或腳踩時(shí)冒大泡的為肥土；水質(zhì)清淡無色，水田不起泡，或氣泡小而易散的為瘦土。

六、看保水性

水分有下滲，但速度平緩，灌水一次可保持1周左右的為肥土地；灌水后水層不下滲或沿裂紋快速下滲的均為瘦土。

七、看是否夜潮

夜潮是指夜間表土溫度降低，深層土壤中的溫暖水汽上行，遇到低溫表土后凝結(jié)成水而濕潤(rùn)表土的現(xiàn)象。夜潮現(xiàn)象能說明土壤的兩個(gè)優(yōu)點(diǎn)：第一，透氣性強(qiáng)，溫暖水汽可以上行。第二，土層較深，能夠形成溫差。所以，有夜潮現(xiàn)象的土壤基本上都是肥土；無夜潮現(xiàn)象，說明土質(zhì)板結(jié)硬化，均為瘦土。

八、看保肥性

土壤是一種帶負(fù)電的膠體，可以交換吸附一些陽離子（就是養(yǎng)分），而達(dá)到保肥的作用，這些被吸附的養(yǎng)分在作物生長(zhǎng)過程中會(huì)逐漸從土壤中釋放出來以供作物吸收利用。肥沃的土壤通常能夠吸附的陽離子較多，肥效持久。而貧瘠的土壤通常陽離子吸附量較少，大部分養(yǎng)分隨水流失，肥效來得快去的快。

四、怎樣知道自己是否有血鉛

一般認(rèn)為有四種。紅細(xì)胞原卟啉（EP）的測(cè)試法、原子吸收光譜法（AAS）、塞曼效應(yīng)石墨爐原子吸收光譜法（GFAAS）、陽極溶出伏安法（ASV）。

什么是紅細(xì)胞原卟啉（EP）測(cè)試法？

紅細(xì)胞原卟啉（EP）升高可以間接反映出人體血鉛的含量。在正常情況下原卟啉（EP）和鐵在鐵絡(luò)和酶的作用下在紅細(xì)胞內(nèi)結(jié)合生成血紅素。在鉛負(fù)荷增高的情況下鐵絡(luò)和酶受到抑制，原卟啉（EP）在紅細(xì)胞內(nèi)堆積。在紅細(xì)胞中，90%的原卟啉（EP）會(huì)以鋅原卟啉（ZPP）形式存在（ZPP）在光照射下會(huì)發(fā)射429nm的熒光，用血液熒光測(cè)定法即可測(cè)得ZPP的含量。

因?yàn)镋P對(duì)光敏感，因此在標(biāo)本送檢過程中應(yīng)注意避光，應(yīng)盡快進(jìn)行測(cè)定。同時(shí)EP增高除了見于鉛中毒外，還見于缺鐵性貧血、感染和先天性卟啉代謝異常性疾?。ㄑ巡〉龋┰跍y(cè)試首先一定要先排除這些造成EP增高的可能。

依據(jù)是大量的研究結(jié)果表明：在鉛濃度為10ug/dl~25ug/dl時(shí)，用EP法檢測(cè)，其診斷的靈敏度和精度都是非常低的。而這一血鉛水平已明確對(duì)兒童健康有害。所以用EP法檢測(cè)會(huì)造成兒童實(shí)際血鉛水平較高而測(cè)量結(jié)果較低，即假陰性現(xiàn)象出現(xiàn)。在美國(guó)，1991年發(fā)表的《預(yù)防幼兒鉛中毒》中，CDC已明確表示不能再用EP測(cè)試法來進(jìn)行兒童鉛含量的普查。

什么是原子吸收光譜法（AAS）？

原子吸收光譜法是一種常規(guī)的元素分析法，可以用來分析常規(guī)樣品中鉛含量。它是基于鉛所產(chǎn)生的原子蒸汽對(duì)特征譜線的吸收作用來進(jìn)行定量分析。首先將試液噴射成霧狀進(jìn)入燃燒火焰中，含鉛鹽的霧滴在火焰溫度下?lián)]發(fā)并離解成鉛原子蒸汽，在用鉛空心陰極燈作光源，它輻射出283.3nm的鉛特征譜線的光，當(dāng)通過一定厚度的鉛原子蒸汽時(shí)，部分光被蒸汽中基態(tài)的原子吸收而減弱。通過單色器和檢測(cè)器測(cè)得鉛特征譜線被減弱的程度，即可求得試樣中鉛的含量。

對(duì)于用火焰原子吸收法做人體血鉛含量分析，無論是用甲基異丁酮萃取血鉛抑或是用螯合劑，它是一種舊的技術(shù)，由于對(duì)人體產(chǎn)生影響的血鉛是微量的，再加上鉛是易揮發(fā)且電離電位較低的元素。使用火焰原子吸收光譜，鉛的原子化率是非常低的，即它的靈敏度是達(dá)不到檢測(cè)人體血鉛的檢測(cè)范圍。并且此方法所需的靜脈血量較多（5~7毫升）。同時(shí)由于在處理血樣的過程中是完全暴露在環(huán)境（如灰塵）中和血樣進(jìn)行硝化處理過程中使用國(guó)產(chǎn)硝酸本身的鉛含量過高，因此可能造成對(duì)血樣的二次污染，會(huì)造成兒童實(shí)際血鉛水平較低而測(cè)量結(jié)果較高，即假陰性現(xiàn)象出現(xiàn)。

什么是塞曼效應(yīng)石墨爐原子吸收光譜法（GFAAS）？

石墨爐原子吸收光譜測(cè)定法已被有效的用來測(cè)定血液中鉛含量。現(xiàn)代的原子爐測(cè)定儀器是可靠、準(zhǔn)確、高精度和全自動(dòng)的。現(xiàn)有的幾家生產(chǎn)商在市場(chǎng)上銷售的原子石墨爐儀器都有測(cè)定血鉛含量的功能（可被設(shè)置）。這類儀器要有塞曼效應(yīng)背景修正系統(tǒng)，并保證用于分析鉛的波長(zhǎng)穩(wěn)定在283.3nm。由于對(duì)人體產(chǎn)生影響的血鉛是微量的，再加上鉛是易揮發(fā)且電離電位較低的元素，如果使用一般火焰的原子光譜，鉛的原子化率是非常低的，即它的靈敏度是達(dá)不到檢測(cè)人體血鉛的檢測(cè)范圍而使用石墨爐原子吸收光譜可以大大提高鉛的原子化效率，使靈敏度大幅度增加而達(dá)到檢測(cè)血鉛的檢測(cè)范圍。但石墨爐原子吸收光譜受光散射和分子吸收的影響比火焰原子吸收量大，因此有必要對(duì)石墨爐原子吸收光譜進(jìn)行背景校正，一般選擇塞曼效應(yīng)校正背景。所以塞曼效應(yīng)校正背景是通過旋轉(zhuǎn)的檢偏器把空心陰極燈的光分成平行于磁場(chǎng)的偏振光PII和垂直于磁場(chǎng)的偏振光PI，在石墨爐加上11K高斯的永久磁場(chǎng)。這時(shí)吸收線便分裂為π、δ+、δ-三個(gè)成分。檢偏器和調(diào)制器一起旋轉(zhuǎn)，使PII和PI以一定頻率交替的通過原子化器。由于吸收線的π成分只吸收PII不吸收PI，故可利用PII測(cè)出原子吸收和背景吸收，PI不被π、δ+、δ-吸收，可以利用PI來測(cè)定背景吸收，兩組吸收訊號(hào)經(jīng)電子系統(tǒng)處理（減法），既得到真實(shí)的原子吸收訊號(hào)，達(dá)到校正背景的目的。

同時(shí)，在使用塞曼效應(yīng)石墨爐原子吸收光譜來測(cè)定血鉛時(shí)，要注意以下幾個(gè)方面的問題：

1、在采血后對(duì)血樣進(jìn)行硝化處理過程中，由于此過程血樣是完全暴露在環(huán)境（如灰塵）中，因此一定注意環(huán)境中的鉛污染血樣。

2、在采血后對(duì)血樣進(jìn)行硝化，硝化的作用是去除血液里的纖維素，使鉛以游離態(tài)的形式存在于溶液中，處理過程中有時(shí)使用國(guó)產(chǎn)硝酸本身的鉛含量就很高，甚至?xí)哂谘獦拥你U含量，因此有必要在使用硝酸對(duì)血樣進(jìn)行硝化處理前先檢測(cè)硝酸的鉛含量并采取措施降低硝酸的鉛的含量，避免血樣的二次污染。

3 、在使用塞曼效應(yīng)石墨爐原子吸收光譜來測(cè)定血鉛時(shí)必須要有專業(yè)技術(shù)人員來完成此操作過程。

什么是陽極溶出伏？安法（ASV）

陽極溶出伏安法（ASV）是測(cè)量各種間質(zhì)中多種金屬的一種電化學(xué)分析方法，它被用來測(cè)定血鉛的濃度已有25年多的歷史。雖然此技術(shù)比較直接，而且儀器也不貴，但此技術(shù)方法在分析時(shí)所要求使用的每個(gè)試劑的價(jià)格卻比石墨爐原子吸收法所用試劑價(jià)格要高，用陽極溶出伏安法的儀器體積很小，比石墨爐原子吸收法所用設(shè)備占用的空間也小，并且也不要求別的特殊輔助設(shè)備。這種分析方法的原理是要求鉛必須從其復(fù)合物中分離出來，并且以游離態(tài)Pb2+離子存在，在鍍汞的石墨電極上加負(fù)的電勢(shì)使游離Pb2+被電鍍?cè)阱児氖茧姌O表層。再在一個(gè)特定的電壓值上，鉛離子又會(huì)從電極上溶出，在此過程中將產(chǎn)生一定的電流，而此電流值正好與血樣中鉛濃度的大小成比例。

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